2020-09-25 來源：研發客
2020年9月25日，聚焦于基因治療和細胞藥物研發公司上海邦耀生物科技有限公司（下稱“邦耀生物”）宣布，首次對外公布了與浙江大學醫學院附屬第一醫院合作開展的“PD-1敲除非病毒定點整合CD19-CART細胞治療復發難治性非霍奇金淋巴瘤的臨床試驗”取得突破性成果。這是世界上首次利用基因編輯技術在PD-1位點實現定點整合的CART治療，也是全球首例非病毒定點整合CART細胞治療淋巴瘤的臨床試驗。同時，最新研究成果已于2020年9月23日在預印本平臺medRxiv上公布，由華東師范大學、浙江大學醫學院附屬第一醫院和上海邦耀生物共同完成。
PD-1定點整合的CD19-CART是邦耀生物利用自主知識產權的Quikin CART?平臺技術，在不使用病毒載體的情況下，一步制備獲得的CART產品。該產品將PD-1免疫檢查點抑制和CART腫瘤殺傷功能合二為一，起到了PD-1免疫治療與CART療法聯合應用的效果。
2例患者在治療3個月后完全緩解
該臨床研究計劃入組患者15例，目前已可評估的4例患者在1個月時均達到了部分緩解（PR）的效果，已經達到3個月評估時間的2例患者獲得完全緩解（CR）。
首例獲得完全緩解的患者于2018年診斷為彌漫大B淋巴瘤IVBE期，經多次放化療治療后，病情仍未得到有效控制。入組前影像學顯示左下腹小腸走形區系膜間隙大小為3.6×3.5cm的病灶，放射性攝取異常增高。2020年5月入組進行PD-1敲除非病毒定點整合CD19-CART細胞的回輸治療，治療后28天PET-CT影像學即顯示FDG代謝較前明顯減低，達到PR，治療90天后的PET-CT影像學顯示病灶全部消失，FDG代謝未見增高，達到CR。
在整個CART治療過程中未發生3級以上藥物相關不良事件，包括細胞因子風暴和神經毒性?；剌敽螅珻ART在體內擴增良好，持續時間較長，D90流式檢測發現外周血中的CART細胞仍維持在一定比例。目前2例患者已經痊愈出院，仍在接受長期隨訪。
患者治療前后影像學檢查對比
該項臨床研究的主要研究者（PI）浙江大學醫學院附屬第一醫院院長黃河說：“彌漫性大B細胞淋巴瘤是最常見的非霍奇金淋巴瘤，目前針對難治復發的患者缺乏有效治療手段。今年我們開始探索基于基因編輯技術的非病毒定點整合型CART的臨床研究，我們非常高興的看到患者經過治療后迅速達到完全緩解狀態，我們期待這一新型的CART技術會為難治復發患者帶來更加便捷、安全和確切的長期治療效果?！?
邦耀生物CART升級2.0版更安全有效
邦耀生物的非病毒定點整合CART技術(Quikin CART?)，可以在不使用病毒載體的情況下，利用CRISPR/Cas9基因編輯技術將CAR元件定點插入到基因組的特定位點，一步實現基因敲除和CAR的穩定整合，屬于邦耀生物2.0版CART的管線產品。
PD-L1/PD-1是抑制T細胞功能的重要免疫檢查點，目前針對PD-L1/PD-1的抑制劑已經在多種類型的惡性腫瘤中取得了良好的療效，也有不少研究報道了PD-1敲除可有效增強CART細胞的功能。非霍奇金淋巴瘤是一種原發于淋巴組織的血液系統惡性腫瘤，占所有淋巴瘤80%~90%，雖然患者在初次治療后疾病得到緩解，但之后往往出現復發。雖然已有CART產品獲批用于復發難治性非霍奇金淋巴瘤的臨床治療，但是總體療效依然有限，而有研究提示抑制PD-1通路可能會帶來更好的臨床效果。
因此，邦耀生物利用Quikin CART?平臺開發了非病毒PD-1定點整合CD19-CART細胞，開展復發難治性非霍奇金淋巴瘤的臨床治療。該產品具有CAR均一性穩定表達、PD1基因敲除的兩大優勢，相當于PD-1抑制劑和CART細胞的強強聯手。在目前已經開展的多例臨床試驗中，該CART產品體現了出色的安全性和有效性。
傳統CART產品的制備主要使用病毒載體，對病毒制備工藝提出了很高的要求，這大大增加了CART細胞的制造成本和難度，阻礙了CART治療的大規模臨床應用；并且價格十分昂貴，如目前上市的CART產品，諾華的Kymriah定價為47.5萬美元，Kite的Yescarta定價為37.3萬美元；此外，由于病毒采用隨機插入的方式將CAR元件整合到細胞基因組中，可能會改變正?；虻谋磉_，存在癌變的安全隱患。Quikin CART?技術無需采用病毒載體進行細胞制備，極大減少了CART產品的生產成本，同時避免了隨機插入的癌變風險。
Quikin CART?技術只需一步即可同時實現T細胞內源基因的調控和CAR的持續性表達。相比于其他CART技術，具有工藝簡單、生產環節少、制備時間短、產品均一性高等優點。該技術平臺可以用于多個免疫檢查點敲除增強型CART細胞的制備，可以快速生產通用型CART細胞，可以開發動態調控的安全型CART產品等，為今后CART細胞的多樣化改造提供了強有力的技術支持。
邦耀生物首席科學家，華東師范大學生命科學學院劉明耀教授表示：“與傳統的自體CART技術相比，Quikin CART? 技術可以在不使用病毒的情況下，一步實現CAR元件在基因組的定點整合和T細胞內源基因的調控干預。這意味著CART細胞的制備工藝、生產環節、制備時間都會大大簡化和縮短，因此極大降低了CART細胞的生產成本，同時減少了病毒隨機插入引起的致瘤風險，也提高了CART產品的均一性。目前結果顯示我們制備的非病毒PD-1定點整合CD19-CART細胞具有巨大的治療潛力，在臨床試驗中表現出了很好的安全性和緩解率?！?
該項目主要負責人、論文第一作者，邦耀生物創新CART研發總監，華東師范大學生命科學學院副研究員張楫欽博士說：“近年來，CRISPR/Cas9基因編輯技術的不斷成熟和發展讓我們萌生了將其應用于CART治療的想法。通過對現有CART技術存在問題的深入剖析，我們意識到利用基因編輯技術來制備非病毒定點整合CART細胞是一個很有潛力的方向。通過大量的方法嘗試和條件摸索，我們建立了成熟的Quikin CART?技術平臺。該技術不需要使用任何病毒，只需一步即可制備出CART細胞，具有現有CART技術不可比擬的諸多優勢。期待今后利用這一技術平臺能開發出更多成功的CART產品，在臨床治療上取得更大的突破?！?
據悉，除了正在開展的非病毒PD-1定點整合CD19-CART臨床研究，邦耀生物也正在布局針對實體瘤的其他非病毒定點整合CART產品，以期在CART療法上取得更大的突破。
文章轉載自 研發客，原文鏈接：http://www.pharmadj.com/cms/detail.htm?item.id=1da960c8fe6b11ea8efdfa163e227c38
